T**********t
发帖数: 1604 | 1 50ng/ml还是50ng/ul啊？前者的话，就太稀了。 |
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b*******6
发帖数: 39 | 2 具体步骤基本是这样的：
1 PCR 50-100 ul体系，所得产物跑胶后回收，所有产物均酶切（大概5ug，可能很多，
但是太少了最后会看不到；Fastdigest推荐protocol是切200ng 1ul酶，10min；所以开
始的时候切3个小时，因为当初质粒3个小时能切下来；后来过夜切，出现2个条带；PCR
产物比比质粒难切）；质粒一般切4ug，3个小时（BamH1切1小时，Hind31小时，碱性磷
酸酶1小时），或者在Bamh1灭活之后Hind3过夜切（BamH1据说明书超过1小时就有星号
活性）；酶切体系50ul，Fastdigest酶各1ul。所有酶切产物切胶回收，nanodrop定量。
2 连接50ng质粒，50ng片段（大小比是5：1，所以数量比大概是1：5），10ul体系，室
温1小时或者4度过夜。
3 转化：5ul产物加入到50-100ul感受态，冰浴30min，42度热激90s，冰浴2min，加入
800ul LB，37度30-45min，3500rpm 3min 离心，留100-200ul混匀细菌涂板。 |
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A**********0
发帖数: 6942 | 3 你的做法：连接50ng质粒，50ng片段（大小比是5：1，所以数量比大概是1：5），
10ul体系，室温1小时或者4度过夜。 转化：5ul产物加入到50-100ul感受态
我觉着太保守了。。。 不过，好多人都是这么一直做的。
你试试不要定量定的那么仔细，大概用500ng片段和100ng质粒做连接，
然后体系变成20ul做一次试试看。。。
PCR
量。 |
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f*****t
发帖数: 901 | 4 国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.
抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基本上要到ppb以下.
但是,有些人的concern是这样是否产生耐药菌,这些耐药菌是不是有可能传到人(虽然可能
性很小).这个问题至今没有结论.但是可能不是大部分人的concern.
参加这个Montana大学的科普文献:
http://animalrangeexten... 阅读全帖 |
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d*********2
发帖数: 48111 | 6 环保也是扯淡。
wholefood的西红柿号称是智利种的。 因为人工便宜。 智利的人工成本和海运到美国
， 哪个地方体现出环保了？
50ng/ |
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a*******t
发帖数: 10093 | 7 说个最简单的，在什么调料都不放的情况下
就说猪肉吧，排骨
国内的清水煮出来，略为发甜的肉香
美国的清水煮出来，一股臊臭气
这个是什么原理？
50ng/ |
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b***y
发帖数: 2799 | 8 现在有些小孩小孩早熟，和饮食里的东西有关系吗？
50ng/ |
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G**L
发帖数: 22804 | 10 批准用的激素分人工合成的和动物本身制造的两种。人工合成的可以检测也有上限，自
然合成的分不出是人加的还是动物自产的，查都不查。如果人加的还没有动物自产的多
，加了根本没有意义
50ng/ |
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H*********S
发帖数: 22772 | 11 “美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素” 这里的“激素”在链接里只是说的各类
hormones, 还有很多非荷尔蒙类别的添加剂不在这讨论之列。美国的行文形式非常注意
扣字眼，或玩字眼，这也是逼得大家请律师的原因，不然被玩死都不知道怎么死的。
比如养猪用的瘦肉精，欧洲和中国法律上禁止任何类型的瘦肉精，美国FDA批准了一些
类别的合法使用，这些就不算hormones
牛用的生长荷尔蒙在欧洲也是禁止的（中国不清楚），而且有研究表明其副作用，但美
国依然可以合法使用
50ng/ |
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t***o
发帖数: 4265 | 12 问个问题：
激素抗生素催大的鸡猪，和自然长大的鸡猪，哪个健康？
50ng/ |
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d****h
发帖数: 4291 | 13 你这科普没用的，很多自甘五和文傻的肉眼分辨率可以秒杀质谱色谱
一眼就能看到ppm的或者千分之一ng的水准
50ng/ |
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B**W
发帖数: 2273 | 14 hehe, 感觉挺能装啊。自己吃有机食品，然后说不是为了安全，是为了环境。那你怎么
不直接买非有机的，然后把省下来的钱直接去做环保？谁也不是傻瓜，大家不是只听其
言，更要观其行。
50ng/ |
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b********e
发帖数: 41 | 15 楼主回避了一个问题：
用天然方式饲养的鸡猪牛，与用各种添加剂饲养的，它们是不一样的(一个正常的人，
和一个天天吃药的人，能一样吗？)。
它们可能各种营养成分(蛋白质，脂肪，维生素等)没有大的差别，甚至喂添加剂的某些
营养成分还多些。
用添加剂饲养的可能也都通过了这些激素，抗生素的含量检测。
但是，在这些动物身上使用了这些激素，抗生素之后，会不会产生其他对人体有害的物
质，目前检测不出来或者没要求检测的化学物质？这些物质会不会不仅仅残留在内脏里
也在肉里？抑或是缺少了某些对人体有益的物质？生物是个很复杂的系统，里面的化学
物质不计其数，每秒钟生物体内有成千上万次化学反应。吃了乱七八糟的化学物质之后
会对生物产生什么作用，我不认为科学上已经完全清楚(大概的流程可能是知道的)。
我认为，用传统天然方式饲养的，与工业化饲养的，它们的肉是不一样的。
怎么不一样，我们不知道，靠你们去研究啦。
我们只知道，它们味道是不一样的。
食用工业化饲养出来的肉，有很大的可能性对人体有害。
50ng/ |
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z**n
发帖数: 22303 | 16 请问不用激素的情况下，是如何神奇的使肉鸡肉猪的生长速度在二十年里翻了一倍都不
止的？
50ng/ |
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k*******g
发帖数: 7321 | 18 没用激素，美国的鸡怎么2个半月到3个月就出栏？正常的肉鸡不加药物，自然生长要长
半年以上才大。难道民主的肉鸡 ，不需要激素，天生比专制的肉鸡长得快？
50ng/ |
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i*c
发帖数: 1132 | 20 我买有机食品，就是觉得更好吃一点。
50ng/ |
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B**W
发帖数: 2273 | 22 “有机食品.我们家也吃有机食品,但是不是因为它们更安全,因为我们觉得环保和感觉
好.”
说了这么一大堆，这个就露马脚了。首先，有机食品未必环保，耗费更多的土地，水，
有机肥，人力，燃料等，杀虫剂也是用的，不过是生物制剂的多。其次，既然有机食品
没有什么特别的，你为什么感觉好呢？
这个就跟支持转基因的差不多，说了一堆，最后还是买有机食品，然后宣称不是为了避
免转基因，只是为了环境啊，激素啊，安全啊一类的。反正大家观其行，至于说什么都
不重要，反正短期内吃什么都死不了人，长期呢，生物学就是一团浆糊，怎么搅和都行
，谁也弄不清。
50ng/ |
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w*****n
发帖数: 2693 | 23 撸主说的都是实情
本版众多WSN自诩理工男，
连这点儿基本的facts都接受不了，甚至吹捧中医的也不在少数
可见素质多么堪忧
50ng/ |
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c*********v
发帖数: 589 | 24 发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: Military
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 01:58:52 2012, 美东)
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素。 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.
抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基本上要到ppb以下.
但是,有些人的concern... 阅读全帖 |
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l****z
发帖数: 29846 | 25 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: Military
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 01:58:52 2012, 美东)
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.
抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基... 阅读全帖 |
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f*****t
发帖数: 901 | 26 国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基本上要到ppb以下.
但是,大家的concern是这样是否产生耐药菌,这些耐药菌是不是有可能传到人(虽然可能
性很小).这个问题至今没有结论.但是可能不是大家的concern.
参加这个Montana大学的科普文献:
http://animalrangeextension... 阅读全帖 |
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t**********0
发帖数: 33 | 29 一下病历，能否翻译成英文
贴到一些国外医生的论坛上？
谢谢了。
各位兄弟姐妹，
大家好！
最近老爸查处前列腺癌骨转移，。
一种方案是切除睾丸，这个会伤害人的心理，所以医生让吃一种抑制激素分泌的药。
目前吃药后，感觉小便要利索一些了。
我的问题是，
这种情况，国际上最新的治疗方案是什么？
有没有什么特效药或者手术方案可以挽救？
我知道我们群上很多人在美国最顶级的医院学习进修，
希望能帮帮忙，给我一些建议，我家经济条件还过得去，
只要能挽救人，延长生存期。
多谢。
下面是病情细节：
诊断： T4N1M1 前列腺癌
参数： TPSA= 3804 ng/ml , FPSA > 50ng/ml
病理诊断：前列腺小块分化腺泡细胞癌(Glesaon IV 级) （2012.2.9）
另一个诊断： 前列腺穿刺 (A1区)， 小条状前列腺低分化腺癌【Gleason 4 级，
Gleason7 (4+3) 分】
全身骨显像 （2012.2.10）全身骨骼多出骨代谢旺盛灶，符合肿瘤多发性骨转移征象。
治疗情况： 给予内分泌治疗。 |
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l*********y
发帖数: 1431 | 30 孕16周做的检查，昨天去看ob的时候，被告知free beta hCG值比较高，50ng/ml, MoM=
5.
请问大家的都大概是多少啊，我妊娠反应比较严重，时间也比较长，一直吐了四个多月
，瘦了>16斤。
现在>19周了，肚子跟同期的别的准妈妈比起来小了很多，好担心啊 |
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发帖数: 1 | 31 我有一次也不知道因为什么事情，好像是有一门生物复习了很久结果还是没有考好，加
上那时候大三找实习压力很大，整个人瞬间就崩溃了（对啊，当时我的心理就是那么得
脆弱）。
从Merkert厕所一直找到Fulton厕所，再从Fulton厕所一直找到Stokes的厕所，天啊，
为什么BC一个厕所比一个厕所多人。当时寒风凛冽，想着，索性就边走边哭吧，可是下
课路上人叫一个多，而且一出门风一吹眼泪都流不出来了，难受了半天发现很饿跑到
Lyons底下买东西吃，那叫一个人山人海。所以根本就没找到地方可以适当发泄下情绪。
后来想说，那要不就约个Counselor调解一下，至少一对一哭起来也是保密的除了
counselor没人知道？没想到BC那时候预约满到要一个多星期后才有时间开放。最后我
去了St.Mary Hall的那个教堂，那里一个人都没有，我足足在教堂里面坐上了30分钟，
向上帝祷告：“上帝啊，如果你听得见，能不能不要让我这么难过......”（我不信教
，所以你可以想象当时我是真被逼到没办法了）教堂很安静，很肃穆，没有杂音，俗话
说，就是那种很神圣的感觉。30分钟后我心情终于平静了很多。
波士顿学... 阅读全帖 |
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p**********u
发帖数: 15479 | 32 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: Military
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 01:58:52 2012, 美东)
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.
抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基... 阅读全帖 |
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u**c
发帖数: 17972 | 33 【 以下文字转载自 USANews 讨论区 】
发信人: lczlcz (lcz), 信区: USANews
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Dec 30 16:46:05 2012, 美东)
发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: Military
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 01:58:52 2012, 美东)
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50... 阅读全帖 |
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c*******o
发帖数: 5387 | 34 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: Military
标 题: 给大家科普一下美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 01:58:52 2012, 美东)
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.
抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.另外,出栏前1个星期不
能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影响,因为量基... 阅读全帖 |
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s**********o
发帖数: 14359 | 35 【 以下文字转载自 WaterWorld 讨论区 】
发信人: firebat (给我一掌海棠红), 信区: WaterWorld
标 题: 给大家科普一下关于美国肉类抗生素和激素的问题
发信站: BBS 未名空间站 (Sat Dec 29 02:01:32 2012, 美东)
中国人关于美国肉类和食品的误区
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.比用来抑制细菌的用量
低很多.另外,出栏前1... 阅读全帖 |
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e******e
发帖数: 2530 | 36 就是啊，况且他最近的这次大麻刚超过NFL旧标准15ng/ml 一点点，新标准50ng/ml， |
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f*****t
发帖数: 901 | 37 中国人关于美国肉类和食品的误区
国人其实在这个事情上有相当的误解.
正好我是做相关方向的,给大家说一下.
首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
随便找的科普:
http://www.drweil.com/drw/u/id/QAA400066
但是即使是牛肉,出栏前几个星期不许再喂.激素半衰期只有几个小时(<10h),因此这段
时期>99.99%人工激素都被动物消除.最后合成激素即使用最灵敏的LC/MS/MS也不许检出
(0.1ng/mL以下的检测线),否则罚款是巨大的.当然动物自己也产生激素,水平在2-50ng/
mL血浆浓度.因此合成激素或者人工添加激素的影响忽略不计.
第二,抗生素.抗生素的使用范围没有限制,但是用量有严格限制.比用来抑制细菌的用量
低很多.另外,出栏前1个星期不能再使用,保证完全消除.所以肉里的抗生素对人没有影
响,因为量基本上要到ppb以下.但是,大家的concern是这样是否产生耐药菌,这些耐药菌
是不是有可能传到人(虽然可能性很小).这个问题至今没有结论.但是可能不是大家的
concern.
参加这个Montana大学的科普... 阅读全帖 |
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f*****t
发帖数: 901 | 38 另外, 很多人说有机食品味道好,这很可能是真的,不过口味因人而异.其实养的方式对
味道的影响比"有机"本身可能更重要.例如,free range的鸡蛋就是比养鸡场笼养的好吃
,无论有机与否.你可以到超市买几种比较一下.还有,放养的鸡更好吃一些,个人感觉.
50ng/ |
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f*****t
发帖数: 901 | 39 美国用的"瘦肉精"(其实很多非常不同的化合物在中国都叫这个)是Ractopamine,据现在
观察对人体无害,特别是:此物代谢非常快,t1/2=4h. 在肉里残余量小.但是不要吃内脏,
如果对这个东西有concern的话.
可以参考wiki
http://en.wikipedia.org/wiki/Ractopamine
但是未来是不是能发现健康问题,现在不知道.虽然现在看来几率不大.
中国发现的clenbuterol,则是有非常大和明显的副作用.
50ng/ |
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p****p
发帖数: 540 | 40 感谢楼主科普，讲的很好。
看来抗生素和激素的残留基本没有大问题，不过美国机械化生产出来的肉口感确实差。
除了口感，用过抗生素和激素的肉有没有别的方面的问题？比如说美国肥胖很严重，是
完全生活方式的问题，还是也有食品工业的问题？
50ng/ |
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c*********p
发帖数: 3217 | 41 首先, 激素使用.
美国政府不允许在家禽和猪饲养中用激素. 牛肉会用.
--------------为什么就牛可以? 奶牛可以吗? 为什么牛奶就不怕...
50ng/ |
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A*****a
发帖数: 52743 | 42 这不叫科普，叫表达了你的opinion
50ng/ |
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a***o
发帖数: 129 | 44 Nothing special. Inserts ratio should be 1:1:1. Vector amount around ~50ng.
Inserts the more the better.
I use epicentre's fast-link ligase. I do three-way ligation routinely and
never failed once. Once for a while I do 4-way ligation, sometimes even with a
blunt end:)
stupid. |
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y******y
发帖数: 107 | 45 目的基因4.8kb, plasmid A 4.7kb。 ligation是用的pGEM－T easy vector的用来测序
的ligation方法，具体是
目的基因 150ng
plasmid A 50ng
T4 DNA ligase 1ul
2xbuffer 5ul
Total volume 10ul,
4C for 16h, 取2ul transformation。 |
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s**x
发帖数: 138 | 46 extracted DNA with mini prep. as required, DNA concentration is 50ng/ml.any
suggestion is greatly appreciated. |
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T**********t
发帖数: 1604 | 47 50ng/ul够了啊，多加几微升不就行了。:) 我送过20ug/ul的样品也测出来过的。关键
还是要够纯。 |
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g*****y
发帖数: 6325 | 48 50ng/ml这个浓度非常非常的低。一般 至少都是50ug/ul
any |
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s********2
发帖数: 138 | 49 嗯,oldmonster 批评的是，我总觉得自己现在的表达水平骤降。我用的是BigDye
teminator cycle sequencing kit进行测序。试剂盒里面自带一个质粒和引物，作为
control，产物和引物比例是200ng：3.2pmol（因为是双链质粒，所以用量大）。我用
的是纯化后的PCR产物和自己的引物，并且产物纯化后的A260/A280也是1.7-2.0。产物
和引物的比例是50ng：3.2pmol。进行cycle 标记，进行了25个循环。然后将标记后的
产物用Ethanol/EDTA 进行纯化。结果是：control出来结果很好，而自己的产物却只有
在很前面的地方有很高的几个峰，根本不是产物。所以我怀疑我的产物根本没有标记上
？不知道这样是不是还是不够详细。希望大家能够帮帮我！ |
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m**********d
发帖数: 137 | 50 新设计了primer，扩增genomic DNA的某片段，170bp左右，用qPCR来定量，primer退火
温度已测好，57°C
用SYBR green做qPCR，SYBR新从BioRad订的
25μl total volume
12.5μl SYBR green master mix + 0.1μl primerF (0.1μM in the fianl
concentration)+ 0.1μl primerR + 50ng genomic DNA + H2O fill up to 25μl
用的PCR program如下：
95°C 10min + (95°C 30sec, 57°C 30sec, 72°C 30sec) 40cycle + dissociation
curve
72°C elongation step读数
结果没有任何信号，dissociation curve当然也没信号或者有一些非常弱且杂乱的信号
我把sample拿出来，跑了个2%agar gel，结果非常清晰干净的一条带，size完全正确，
看不到primer dimer或者其他non-specific ... 阅读全帖 |
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