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Biology版 - GFP or luciferase or others?
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m****r
发帖数: 383
1
想改造一个tumor cell line, 加上荧光标记,以后打老鼠,可以用来看tumor
formation, 以及收集起来做flow cytometry。犹豫用什么tag 好。GFP 还是
luciferase, 或者其他?谢啦。
m****r
发帖数: 383
2
自己顶一下。
我查了查,初步印象是,GFP荧光相对弱,不太适合用来观察deep tissue的tumor.但是
表达luciferase的tumor cell似乎不适合用来做flow cytometry,因为加底物luciferin
可能会破坏细胞。谁有经验么?

【在 m****r 的大作中提到】
: 想改造一个tumor cell line, 加上荧光标记,以后打老鼠,可以用来看tumor
: formation, 以及收集起来做flow cytometry。犹豫用什么tag 好。GFP 还是
: luciferase, 或者其他?谢啦。

o*****a
发帖数: 2335
3
俺刚看的一个文章同时用Luciferase和DsRed2
m****r
发帖数: 383
4
能给个文章的链接么?谢啦。
我也刚看到有公司卖luciferase and tomota双标记的,死贵,3000多刀。

【在 o*****a 的大作中提到】
: 俺刚看的一个文章同时用Luciferase和DsRed2
s******y
发帖数: 28562
5
You should use Tdtomato, because it is bright and because it avoid most of
the intrinsic fluorescence (which is kind of green).
I won't use luciferase because it is hard to get the substrate to penetrate
the cell.

【在 m****r 的大作中提到】
: 想改造一个tumor cell line, 加上荧光标记,以后打老鼠,可以用来看tumor
: formation, 以及收集起来做flow cytometry。犹豫用什么tag 好。GFP 还是
: luciferase, 或者其他?谢啦。

o*****a
发帖数: 2335
6
http://www3.interscience.wiley.com/journal/121586885/abstract?CRETRY=1&SRETRY=0

【在 m****r 的大作中提到】
: 能给个文章的链接么?谢啦。
: 我也刚看到有公司卖luciferase and tomota双标记的,死贵,3000多刀。

m****r
发帖数: 383
7
Thank you. I am thinking to use both. luciferase for detecting tumors in
deep tissues, and Tdtomoto for flow cytometry.

penetrate

【在 s******y 的大作中提到】
: You should use Tdtomato, because it is bright and because it avoid most of
: the intrinsic fluorescence (which is kind of green).
: I won't use luciferase because it is hard to get the substrate to penetrate
: the cell.

m****r
发帖数: 383
m****r
发帖数: 383
9
想问一下,如果用于detect tumors in deep tissues,Tdtomato是不是也就够了? 考虑
买一个Tdtomato single labeled的cell line, 比double labeled 的便宜1000刀呢。

penetrate

【在 s******y 的大作中提到】
: You should use Tdtomato, because it is bright and because it avoid most of
: the intrinsic fluorescence (which is kind of green).
: I won't use luciferase because it is hard to get the substrate to penetrate
: the cell.

r****r
发帖数: 379
10
one paper said that you can express an enzyme which can produce the
substrates

penetrate

【在 s******y 的大作中提到】
: You should use Tdtomato, because it is bright and because it avoid most of
: the intrinsic fluorescence (which is kind of green).
: I won't use luciferase because it is hard to get the substrate to penetrate
: the cell.

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