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Biology版 - Biotin-tagged 的蛋白从beads 上洗不下来咋办?
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GST-tagged protein purification by Glutathione Sepharose 4B遇到的难题his-tagged蛋白纯化问题
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有人用sulfo-NHS-LC-biotin吗?求mass spec高人指点
3X flag tag求助:用质谱鉴定蛋白
包子求赐教-也问streptavidinStreptavidin求问
请推荐好用的streptavidin beads/resin/cartridge有没有什么技术是可以Screen 细胞膜上蛋白表达情况的
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话题: biotin话题: beads话题: mm话题: elution话题: tagged
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p**i
发帖数: 3525
1
已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
谢谢了先?
s****a
发帖数: 436
2
试一下glycine呢?

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

a***e
发帖数: 1010
3
how do you know your proteins are on the beads?
how about biotin competitive elution?

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

s****a
发帖数: 436
4
Purification of biotinylated proteins on streptavidin resin: A protocol for
quantitative elution。
For elution of biotinylated proteins, 500 mL
release solution (2% SDS, 30 mM biotin, 50 mM phosphate,
100 mM NaCl, 6 M urea, 2 M thiourea, pH ,12)
were added to the resin and incubated for 15 min at RT,
followed by incubation for 15 min at 96C. Afterwards, the
resin was pelleted by centrifugation for 5 min at 16 100g

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

n******d
发帖数: 1055
5
我有答案,绝对管用,但需要包子。你有多少?
p**i
发帖数: 3525
6
1

【在 n******d 的大作中提到】
: 我有答案,绝对管用,但需要包子。你有多少?
s******y
发帖数: 28562
7
This is the correct protocol to be used.

for

【在 s****a 的大作中提到】
: Purification of biotinylated proteins on streptavidin resin: A protocol for
: quantitative elution。
: For elution of biotinylated proteins, 500 mL
: release solution (2% SDS, 30 mM biotin, 50 mM phosphate,
: 100 mM NaCl, 6 M urea, 2 M thiourea, pH ,12)
: were added to the resin and incubated for 15 min at RT,
: followed by incubation for 15 min at 96C. Afterwards, the
: resin was pelleted by centrifugation for 5 min at 16 100g

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