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Biology版 - 借人气问一个半年搞不定的专业问题?
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双酶切奇怪条带TA 克隆
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话题: 整合话题: pcr话题: 位点话题: 搞不定话题: 气问
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q*****d
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老板给了一个研究transposon定位的问题,半年多也搞不定,请专家学者们给分析一下:
就是一质粒被线性化之后转化到动物细胞之中进行随机整合,这个整合位点随着分裂会
在同一个位点形成好几百个copy,现在老板想让我把整合位点给找出来。我试了Random
PCR和Digest DNA, ligate with adaptor, PCR,但是这两种方法都没有找到整合位
点,测序结果发现,PCR产物都是来源于转化载体。我也查了一些文献,都说自己的方
法行,但不知道那个方法更实用?因为一个整合位点只有前后两个结合点是需要的信息
,而那个载体本身的copy数却有好几百,所以干扰非常的大。
请牛人们帮忙分析一下!
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