c*******e
发帖数: 5818 | 1 我能不能直接用PCR product为entry DNA做LR cloning，我的target vector has R4--
ccdB--R3，我想用PCR product has L4--PCR--L3，不知这样可以不。这样可以跳过BP
cloning。多谢 |
s**********n
发帖数: 29 | |
c*******e
发帖数: 5818 | 3 谢了，那我就去试试！
【在 s**********n 的大作中提到】
: 可以
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l******a
发帖数: 3339 | 4 没问题
【在 c*******e 的大作中提到】
: 我能不能直接用PCR product为entry DNA做LR cloning，我的target vector has R4--
: ccdB--R3，我想用PCR product has L4--PCR--L3，不知这样可以不。这样可以跳过BP
: cloning。多谢
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c*******e
发帖数: 5818 | 5 又看了一下，这att L R 序列太长了，直接连在pcr引物上太困难了，有什么好办法吗？
【在 l******a 的大作中提到】
: 没问题
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c*******e
发帖数: 5818 | 6 有什么好的建议吗？多谢！
吗？
【在 c*******e 的大作中提到】
: 又看了一下，这att L R 序列太长了，直接连在pcr引物上太困难了，有什么好办法吗？
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l******a
发帖数: 3339 | 7 我是把他从vector上pcr下来的。可以用长primer，但是这个不好p，因为primer会
dimerize，但不是不行。
吗？
【在 c*******e 的大作中提到】
: 又看了一下，这att L R 序列太长了，直接连在pcr引物上太困难了，有什么好办法吗？
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c*******e
发帖数: 5818 | 8 没太明白，我的entry DNA is PCR product，因为没有att LR，所以想再引物上加。你
这听起来象你的entry DNA已经有flank的att LR site，这样是不是就可以直接用
vector去做了。
【在 l******a 的大作中提到】
: 我是把他从vector上pcr下来的。可以用长primer，但是这个不好p，因为primer会
: dimerize，但不是不行。
:
: 吗？
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